"GLC-15 Adherent人肺癌腺細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
GLC-15 Adherent人肺癌腺細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:①進(jìn)無(wú)菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開(kāi)始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕,安裝吸管帽、打開(kāi)或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼,以防退火;燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用;已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過(guò)火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng),以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過(guò)早開(kāi)瓶,開(kāi)瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過(guò)早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話,咳嗽以防止來(lái)自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí),應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來(lái)的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行;無(wú)菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無(wú)菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點(diǎn)是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉,熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCIH1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞
RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
GLC-15 Adherent人肺癌腺細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案:1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決;2)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決;3)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度;4)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng),而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞、SNU520細(xì)胞
A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞
C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞
NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞
16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞
GLC-15 Adherent人肺癌腺細(xì)胞系
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
32D.cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞
PANC0813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293c18細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞
NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞
H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞
GT39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
SKMel-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 207細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞、A-498細(xì)胞
KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞
A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞
ARPE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
Hs 737.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 F細(xì)胞、BT細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞
HPB/ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞
P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞
HCFB(HCF)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞
SKml2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細(xì)胞、C-32細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞
CHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞
HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞
H-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-661細(xì)胞、CAL62細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞
HEK-293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞
GLC-15 Adherent人肺癌腺細(xì)胞系
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞
A-172 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞
EO771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH841細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、GLC82細(xì)胞
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS-751細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、HMEL細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞、YD15細(xì)胞
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