"L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng):①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材;②每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持:細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn),要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
PFSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話,你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿,因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈;2)不要頻繁看細(xì)胞。對(duì)于初學(xué)者而言,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒有任何好處,特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周圍,形成有利于生長(zhǎng)的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞,細(xì)胞老是長(zhǎng)不好。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長(zhǎng);3)不要怕消化。在傳代的時(shí)候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過度,早早地終止消化。細(xì)胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候,37度消化過夜,細(xì)胞也沒事。我一般是等細(xì)胞完全變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來。還有,動(dòng)作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大,對(duì)細(xì)胞的傷害也是很大的。
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
P3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞
G-401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細(xì)胞、OC316細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞
SK-ChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細(xì)胞系
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞
OV1/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞
B16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞
Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、HLE細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
HNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞
HEK293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7951細(xì)胞、H920細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞
RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
NE1-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU668細(xì)胞、H-1105細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞
ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞
WI38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH748細(xì)胞、WC00059細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞
H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
SPDC-CCL141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞
H-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc813細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞
BGC-823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細(xì)胞、7404細(xì)胞、H-2106細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞
HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞
NUGC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-735細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞
PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞
HCV-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
L-M(TK-) Adherent小鼠結(jié)締組織細(xì)胞系
Huh-7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞
MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
VP 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞
aNK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA8細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞
RIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AKR細(xì)胞、H-2081細(xì)胞、H8細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
SKG-3a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL5細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、Mevo細(xì)胞
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
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