"RK 13 Adherent兔腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時,需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RK 13 Adherent兔腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕?xì)胞】1)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細(xì)胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
RK 13 Adherent兔腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
以下對初次培養(yǎng)細(xì)胞人員來說,是非常好的開門教程:準(zhǔn)備室的設(shè)備:單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺;配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液);培養(yǎng)室的設(shè)備:液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實(shí)驗(yàn)記錄);必須放在無菌間的設(shè)備:離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌:定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外燈照射;實(shí)驗(yàn)前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘;實(shí)驗(yàn)后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺;實(shí)驗(yàn)人員的無菌準(zhǔn)備:肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦凈雙手。
PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞
CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞
Rat1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、SW 780細(xì)胞
PLC PRF 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RLE-6TN細(xì)胞、U-2932細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞
VMCUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞、NOR10細(xì)胞
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞
H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLCPRF5細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞
HCT 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
AG06814-N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-838細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞、TE8細(xì)胞
SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞
NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
RK 13 Adherent兔腎細(xì)胞系
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
PC-3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞
PC-3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞
GM637A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910 PM細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
NCIH292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞、BRL細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
W133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN 4細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞
PANC403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM223細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、H-929細(xì)胞
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
RCC10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
HIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 600.T細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
Institute for Medical Research-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
CHG5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞
SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU8686細(xì)胞、KG-1細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
C22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞
MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞
Lewis Lung Cancer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞
TOV112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞
RK 13 Adherent兔腎細(xì)胞系
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞
He-La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細(xì)胞、J 82細(xì)胞、THP1細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
H-4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞
D10.G4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞
CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
Rat1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1細(xì)胞、SW1463細(xì)胞、SW 579細(xì)胞
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