"B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；雄性；C５７BL/６
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：①進(jìn)無(wú)菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用；已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過(guò)火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過(guò)早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過(guò)早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來(lái)自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來(lái)的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行；無(wú)菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無(wú)菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點(diǎn)是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉，熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
H-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細(xì)胞、H1155細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
SKMel-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)培養(yǎng)基選購(gòu)基本指南：如何選擇培養(yǎng)基：經(jīng)常聽(tīng)到有人問(wèn)，這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)問(wèn)題的答案可以很簡(jiǎn)單，也可以好復(fù)雜。為什么這樣說(shuō)呢?如果這種細(xì)胞是購(gòu)自一些細(xì)胞庫(kù)，那很簡(jiǎn)單，問(wèn)供應(yīng)商就行了?；蛘哒业较嚓P(guān)的文獻(xiàn)，作為參考。培養(yǎng)基這么多種，要選擇起來(lái)也是個(gè)頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的，或者是專門針對(duì)某一種細(xì)胞的，如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的，也就是說(shuō)其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻(xiàn)、讓供應(yīng)商推薦，然后用自己的細(xì)胞做幾次傳代培養(yǎng)來(lái)選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實(shí)踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品：首先，當(dāng)然需要找對(duì)品牌，其次是找對(duì)自己所在區(qū)域的品牌代理商，針對(duì)自己所養(yǎng)的細(xì)胞，咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關(guān)于培養(yǎng)基品牌，目前公司所知道的高校實(shí)驗(yàn)室有些同學(xué)在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品，也有同學(xué)在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用；MEM：成分簡(jiǎn)單，貼壁細(xì)胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：適合細(xì)胞密度低，生長(zhǎng)困難的細(xì)胞。如雜交細(xì)胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng)；RPM１６４０：應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，主要針對(duì)淋巴細(xì)胞，也適合其他細(xì)胞；１９９、１０９培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好；F１０培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng)；F１２培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無(wú)血清培養(yǎng)；McCoy’s５A(chǔ)培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)。
OUMS27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
HEK293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞、U87MG細(xì)胞
HCCC9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞
TE-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞、H2291細(xì)胞
C-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞
RBL 2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2023細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞、C4-2細(xì)胞
MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞
NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞
HEL-92-1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-70細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞
751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞
GM637A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910 PM細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞
OVCA 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細(xì)胞、RT-112細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞
HCC 94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞
UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞
UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞
KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
RPMI 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞
CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞
R D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞
H-2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kelly細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞、Reh細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞
HDF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-330細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞
H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞
MC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
AR42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細(xì)胞、TI-73細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞
KP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細(xì)胞、PAa細(xì)胞、NRCC細(xì)胞
MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
HEC-1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL2細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞
A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞
B16-BL6 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
LAN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82sclc細(xì)胞、207細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞
IHH-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞
NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
DMS 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞
MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞
P3X63NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細(xì)胞、KNS81細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、TM4細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞
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