"RCC4 Adherent人腎癌細胞系
細胞背景資料:腎透明細胞癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RCC4 Adherent人腎癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
Hs_578t細胞系相關產(chǎn)品:NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
HEYA8細胞系相關產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
AtT 20細胞系相關產(chǎn)品:HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
Hs675T細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
HONE1細胞系相關產(chǎn)品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
細胞生長特性:貼壁
RCC4 Adherent人腎癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)相關培養(yǎng)基選購基本指南:如何選擇培養(yǎng)基:經(jīng)常聽到有人問,這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單,也可以好復雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫,那很簡單,問供應商就行了?;蛘哒业较嚓P的文獻,作為參考。培養(yǎng)基這么多種,要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的,或者是專門針對某一種細胞的,如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細胞基礎培養(yǎng)基, 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的,也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應商推薦,然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品:首先,當然需要找對品牌,其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商,針對自己所養(yǎng)的細胞,咨詢供應商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關于培養(yǎng)基品牌,目前公司所知道的高校實驗室有些同學在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品,也有同學在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用;MEM:成分簡單,貼壁細胞;DMEM:分高糖型和低糖型;IDMEM:適合細胞密度低,生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選,DNA轉染后轉化細胞的篩選培養(yǎng);RPM1640:應用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng),主要針對淋巴細胞,也適合其他細胞;199、109培養(yǎng)基:成分齊全,培養(yǎng)效果較好;F10培養(yǎng)基:適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng);F12培養(yǎng)基:適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng);McCoy’s5A培養(yǎng)基:特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。
Fox/NY細胞系相關產(chǎn)品:ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
WEHI 3B細胞系相關產(chǎn)品:Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關產(chǎn)品:HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
NCI-H1792細胞系相關產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
KATOIII細胞系相關產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
Karpas-422細胞系相關產(chǎn)品:Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
LC-1Sq細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
NCIH524細胞系相關產(chǎn)品:SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品:H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
Oregon J-111細胞系相關產(chǎn)品:RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
MHCC-LM3細胞系相關產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
OCILY3細胞系相關產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
OCI/AML2細胞系相關產(chǎn)品:BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
RCC4 Adherent人腎癌細胞系
MDA134細胞系相關產(chǎn)品:RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
CCLP-1細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞
HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
H-EMC-SS細胞系相關產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
SNU1細胞系相關產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
DMS-79細胞系相關產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
AR4-2J細胞系相關產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
NCI-H226細胞系相關產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
HT-1376細胞系相關產(chǎn)品:SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
BHT101細胞系相關產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
NT2/D1細胞系相關產(chǎn)品:H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
NCIH1975細胞系相關產(chǎn)品:SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
Vero 76細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
NCI-H87細胞系相關產(chǎn)品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
NP69細胞系相關產(chǎn)品:H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
OS-RC-2細胞系相關產(chǎn)品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
HFL細胞系相關產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
HTR8細胞系相關產(chǎn)品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
NCI-H2342細胞系相關產(chǎn)品:174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
KG1細胞系相關產(chǎn)品:BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
ONS76細胞系相關產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
SUM 159PT細胞系相關產(chǎn)品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
EAC細胞系相關產(chǎn)品:U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
NRK52E細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品:HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
H-1417細胞系相關產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
LL/2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
Wien-133細胞系相關產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
H1882細胞系相關產(chǎn)品:HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
AML-12細胞系相關產(chǎn)品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
Hs 940.T細胞系相關產(chǎn)品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
BC3H1細胞系相關產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
Eca109細胞系相關產(chǎn)品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
hOMF細胞系相關產(chǎn)品:Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
P3X63 Ag8細胞系相關產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
SNU-119細胞系相關產(chǎn)品:HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
C166細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
NOR10細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
OCM1A細胞系相關產(chǎn)品:686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
RCC4 Adherent人腎癌細胞系
UMUC1細胞系相關產(chǎn)品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
MASMC細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
2PK3細胞系相關產(chǎn)品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
TR-146細胞系相關產(chǎn)品:MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
OSK-1細胞系相關產(chǎn)品:REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
Rin-M-5F細胞系相關產(chǎn)品:HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
SU8686細胞系相關產(chǎn)品:BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
143B細胞系相關產(chǎn)品:JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關產(chǎn)品:KMS-26細胞、EL 4細胞、SW 1222細胞
NWA細胞系相關產(chǎn)品:NCI H2106細胞、LTEPa2細胞、P388-D1細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關產(chǎn)品:HLF細胞、SKNBE2細胞、Nakata-1細胞
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