"HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細胞系
細胞背景資料:支氣管上皮細胞;HPV16轉(zhuǎn)化;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
4T1.2細胞系相關產(chǎn)品:SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關產(chǎn)品:SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
OE19細胞系相關產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H441細胞系相關產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
SU4細胞系相關產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
LS 174T細胞系相關產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
細胞生長特性:貼壁
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:1)CO2培養(yǎng)箱:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要;2)烘箱(干燥箱):用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內(nèi)溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外,移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
HCC-95細胞系相關產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
Jurkat細胞系相關產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
A-101D細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
CAL 78細胞系相關產(chǎn)品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
NCI-H1092細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
RWPE2細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
COLO 320DM細胞系相關產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
NIH 3T3細胞系相關產(chǎn)品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
ARIP細胞系相關產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
IGROV1細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細胞系
Mo 59J細胞系相關產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
H-82細胞系相關產(chǎn)品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
HCC-1569細胞系相關產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
FU-OV-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞
TPC-1細胞系相關產(chǎn)品:OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
NCIH748細胞系相關產(chǎn)品:A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
CCRF/CEM細胞系相關產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
DHL4細胞系相關產(chǎn)品:IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
NRK 52E細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
SPC-A1細胞系相關產(chǎn)品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
NCI-H1184細胞系相關產(chǎn)品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
BV173細胞系相關產(chǎn)品:RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
RPMI-7951細胞系相關產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
Walker256細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關產(chǎn)品:KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
NCI-H1915細胞系相關產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
108CC15細胞系相關產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
NCIH1755細胞系相關產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產(chǎn)品:Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
WB F344細胞系相關產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
H1618細胞系相關產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
Hs 888.Lu細胞系相關產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
Hs 578.Bst細胞系相關產(chǎn)品:H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關產(chǎn)品:2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
A 549細胞系相關產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
GM07404細胞系相關產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
JB-6細胞系相關產(chǎn)品:H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
H-2029細胞系相關產(chǎn)品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關產(chǎn)品:EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
OCIAML3細胞系相關產(chǎn)品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
MM.1S細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
P388-D1細胞系相關產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
P388-D1細胞系相關產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
BHP10-3細胞系相關產(chǎn)品:A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
RLE-6TN細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
MCAEC細胞系相關產(chǎn)品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
NCIH2342細胞系相關產(chǎn)品:RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細胞系
R1610細胞系相關產(chǎn)品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
Line 522細胞系相關產(chǎn)品:H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品:KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
OCI-Ly3細胞系相關產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
CCRF/CEM細胞系相關產(chǎn)品:M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
GM2131細胞系相關產(chǎn)品:RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
SL-29細胞系相關產(chǎn)品:MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
M-G63細胞系相關產(chǎn)品:SKMel-5細胞、Tca8113細胞、PaCa2細胞
SUDHL-16細胞系相關產(chǎn)品:F-81細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、SW-403細胞
A-101D細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、EFM19細胞、P3 (Jiyoye)細胞
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