"KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：食管鱗癌；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長，此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：①進(jìn)無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點(diǎn)是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉，熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
FLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs68細(xì)胞、PC10細(xì)胞、SNU484細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞
NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:１)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決；２)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉，留１０ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度８０%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決；３)對(duì)于生長緩慢的貼壁細(xì)胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度；４)對(duì)于生長不均的貼壁細(xì)胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白)，此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
J.E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
CCD1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H711細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、MM134細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細(xì)胞系
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞
MC3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞
VMCUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞、NOR10細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞
SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
Panc-813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IA-LM細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞、OE-19細(xì)胞
MDA-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-CTRL細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞
BHK21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97細(xì)胞、H2135細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞
NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R 1610細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
OCI-Ly03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細(xì)胞、A-253細(xì)胞、MC/9細(xì)胞
BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞
P31/FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2A細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞
LTEP-a-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BOWES細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞、A498細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞
KYSE-520 Adherent人食管鱗癌細(xì)胞系
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
RL-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、MDA468細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞
H-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH91細(xì)胞、KGN細(xì)胞、RD細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
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