"CHG-5 Adherent人惡性膠質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料:少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CHG-5 Adherent人惡性膠質(zhì)瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
MO59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NBL_S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
C 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
細胞生長特性:貼壁
CHG-5 Adherent人惡性膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
Kuramochi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
SU86_86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞
CHG-5 Adherent人惡性膠質(zhì)瘤細胞系
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
RAW2647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
OV1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
HCC-4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞
NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
MDA-MB-231-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
IMR32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
U-138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
Okayama University Medical School-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
BV173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
Jurkat 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
CHG-5 Adherent人惡性膠質(zhì)瘤細胞系
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
COR-L26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細胞、MDBK (NBL-1)細胞、Scott and White No. 13細胞
CNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細胞、A 72細胞、RPMI-2650細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、P-19細胞、MDA-MB 468細胞
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