"H3396 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：乳腺癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
H3396 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴(yán)重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
TE 354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
D-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Y79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
細胞生長特性：貼壁
H3396 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
H3396 Adherent人乳腺癌細胞系
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
hTERT-RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
MM1.S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
MM1.S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
Fao細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
COLO-824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
SK-MEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞
751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
LS513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
EFM192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細胞、HSC（Human Schwann）細胞、SU-DHL-8細胞
R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞
Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞
GM04678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
H3396 Adherent人乳腺癌細胞系
SK-N-BE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細胞、Metastatic Variant 522細胞、SNU387細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、AZ 521細胞、NCI-H23細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細胞、Hs 274.T細胞、Capan 2細胞
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