"Ect1/E6E7 Adherent人宮頸永生化鱗狀細胞系
細胞背景資料:宮頸;女性;HPV-16轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Ect1/E6E7 Adherent人宮頸永生化鱗狀細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
C1R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
細胞生長特性:貼壁
Ect1/E6E7 Adherent人宮頸永生化鱗狀細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞
YT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
MDA175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL28細胞、HN6細胞、MDA-MB-435細胞
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
KMS-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞
T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
Ect1/E6E7 Adherent人宮頸永生化鱗狀細胞系
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
BC3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
HNE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
SKNMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
GM05372E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
CAL120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR90細胞、OCILY-19細胞、RK-13細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
NCI H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
U251n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
WERI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
ROS-17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
Ect1/E6E7 Adherent人宮頸永生化鱗狀細胞系
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
MCF10-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞
WM35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
KNS-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
NCI-H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
HCT.116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-Rb 50細胞、EB-2細胞、OCI-Ly01細胞
CORL26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239A細胞、Kit225/K6細胞、L5178-R細胞
HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、FC33細胞、SVG(P12)細胞
"