"C8161 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:皮膚黑色素瘤;腹壁轉(zhuǎn)移;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
C8161 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
OCILY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、CV-1細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞
OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82細(xì)胞、CPAE細(xì)胞、A-427細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
C8161 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
RMG-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞、293T/17細(xì)胞
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
Caki2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2C細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞
C8161 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細(xì)胞、A2058細(xì)胞、AdHek細(xì)胞
SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞
FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞
FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
Tu 177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞
T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞
HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
HT22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞
SF-767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
HUT-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC23細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞
HEK-293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞
Hs294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細(xì)胞、DanG細(xì)胞、J-82細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞
OACP4 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1581細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞
PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
BT-483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞
SPDC-CCL141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
C8161 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
CHP-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞
COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞
CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8-653細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細(xì)胞、MC-4細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞
Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細(xì)胞、H1385細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
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