"hTERT-HPNE Adherent人胰腺導管上皮細胞系
細胞背景資料:胰腺導管;HGNC-TERT轉化;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
hTERT-HPNE Adherent人胰腺導管上皮細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
L-6TG細胞系相關產品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
RTMC細胞系相關產品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
LIXC002細胞系相關產品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
3D4/21細胞系相關產品:32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
3D4/21細胞系相關產品:32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
3T3J2細胞系相關產品:UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞
細胞生長特性:貼壁
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細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
MCA 38細胞系相關產品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
OsA-CL細胞系相關產品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
NCI-H211細胞系相關產品:H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
aTC1-6細胞系相關產品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
MCF10-A細胞系相關產品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
Hs-695-T細胞系相關產品:H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
BEL7402細胞系相關產品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
CMEC/D3細胞系相關產品:DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
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2BS細胞系相關產品:alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
H-2122細胞系相關產品:SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
HEL-92.1.7細胞系相關產品:H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
BIC1細胞系相關產品:NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
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ARO細胞系相關產品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
Hs294T細胞系相關產品:MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
HCC70細胞系相關產品:NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞
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H9細胞系相關產品:8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞
H-2107細胞系相關產品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
AML12細胞系相關產品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
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DBTRG-05MG細胞系相關產品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞
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LAPC-4細胞系相關產品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
KM12 SM細胞系相關產品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
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H.Ep. No. 2細胞系相關產品:RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
MDAMB435S細胞系相關產品:Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
KG1細胞系相關產品:BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
NCI-H1395細胞系相關產品:NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞
hMSC-BM細胞系相關產品:YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
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MOLT 4細胞系相關產品:NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
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COLO680N細胞系相關產品:CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
HuLEC-5a細胞系相關產品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
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SUDHL-5細胞系相關產品:MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
NCI-H128細胞系相關產品:UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
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MDA-MB 231細胞系相關產品:HCT 116細胞、hMSC-BM細胞、LIPF178C細胞
VK2細胞系相關產品:COR-L26細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、BrCL18細胞
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