"HSAEC1-KT Adherent人肺小氣道上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肺；HGNC-TERT轉(zhuǎn)化；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HSAEC1-KT Adherent人肺小氣道上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
B-95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞
NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
HSAEC1-KT Adherent人肺小氣道上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMA細(xì)胞、H719細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
SK-MES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞、MB468細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
HSAEC1-KT Adherent人肺小氣道上皮細(xì)胞系
Med 283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、MS751細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
HGMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞
RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞、H-735細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
C3H10T1-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-1細(xì)胞、BT 325細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞
OSRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
EoL-1 cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746-T細(xì)胞、NGP細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
RPMI8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TERT-RPE1細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
Kit225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞
Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞
SKNF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞
Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69SV40T細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞
U-373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-132細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞、GS9L細(xì)胞
CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞
NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞
UM-UC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞
D-324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-182細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、H2066細(xì)胞
HSAEC1-KT Adherent人肺小氣道上皮細(xì)胞系
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
HCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2B細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
M-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞
NCI-H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、SF763細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、786.O細(xì)胞
MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
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