"KTA7 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肺腺癌
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KTA7 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
6T-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-449細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
KTA7 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
HBL100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB985細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞
FRhK4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH508細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞
HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞
NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
UWB1289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞
KTA7 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
RL95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMVECs細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞
LPC-H12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 42細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
SMA560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
MDA.MB.231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞
PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
FLC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞
KMS-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞
NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞
SK-ChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sc-1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞
IPAM-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、BEND細(xì)胞
C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞
P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞
NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 432細(xì)胞、PF-382細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
KTA7 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞
Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞
NCIH660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞
LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞
RPMI #8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：He La細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞
LO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 29細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞
COLO-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
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