"NCI-H295R Adherent人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎上腺皮質(zhì)癌；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H295R Adherent人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
FM-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞
SKO007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、D341細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
NCI-H295R Adherent人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
LK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAEC細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、A1847細(xì)胞
SNK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
HNE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04678細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
HCCC9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
PC-3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞
LAD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293FT細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
NCI-H295R Adherent人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞系
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞
PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
GLRK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS-2細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞、67NR細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞
P31-FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：801-D細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞、SL-29細(xì)胞
NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞
OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞
SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞
BHK21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97細(xì)胞、H2135細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞
RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞
L5178Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞、PL-5細(xì)胞
RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞
alpha TC1 clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemic 1210細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞、H19-7細(xì)胞
SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
MDCK Type II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMH細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
PC3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞
OSRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞
16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
HCC1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞
P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
NCI-H295R Adherent人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞系
H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
Fetal Human Colon細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、SR786細(xì)胞
Simpson細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞
MLMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞、RH8994細(xì)胞
Cates-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK 21細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞
H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細(xì)胞、U343細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、HN-6細(xì)胞
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