"HuH-28 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肝內(nèi)膽管癌
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HuH-28 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細(xì)胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
HuH-28 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
Fu97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC/Y細(xì)胞、T 84細(xì)胞、LN 229細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
FC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、AM38細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
RPMI7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞
SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞
GM06141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細(xì)胞、THP 1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
HuH-28 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
TH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、SC1細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-69細(xì)胞、WI38細(xì)胞、H-292細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細(xì)胞、SW900細(xì)胞、H283細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
JIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468細(xì)胞、LS1034細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
LAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞
OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
HUT-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞
QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞
KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞
751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
HuH-28 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
H-2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
Giant Cell Tumor細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞
SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞
HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
HcaF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、RT-112細(xì)胞
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞
LN 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMVEC細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞
HECCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
Fu97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC/Y細(xì)胞、SC細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
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