"3D4/21 Adherent豬肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肺泡巨噬細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；Landrace
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過(guò)程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
3D4/21 Adherent豬肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
hTERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs821T細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
3D4/21 Adherent豬肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開(kāi)紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒(méi)用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專(zhuān)用儀器設(shè)備以及專(zhuān)用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專(zhuān)用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類(lèi)似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒(méi)了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞
SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
SW 1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細(xì)胞、H-345細(xì)胞、GT38細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
3D4/21 Adherent豬肺泡巨噬細(xì)胞系
MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
VP 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
U-343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
FCCH1024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
AMJ2C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細(xì)胞、BE2C細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
Tu-686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞
NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞
CNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細(xì)胞、SP-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細(xì)胞、LK-2細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
T-47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-TN5B1-4細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞、KMST6細(xì)胞
hTERT-RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA'87細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞
NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
HuP-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
3D4/21 Adherent豬肺泡巨噬細(xì)胞系
PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞
CW2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞
SGC7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
TYKnu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1915細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞
251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2BS細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞
TMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU3細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞
PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞
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