"LLC-PK1 Adherent豬腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎；自發(fā)永生；Hampshire
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
LLC-PK1 Adherent豬腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細(xì)胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
LLC-PK1 Adherent豬腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
B16 F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細(xì)胞、H-1703細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞
Hu-P-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV362細(xì)胞、697細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞
SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞
CHO Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、A375S2細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
LNCaP-C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6細(xì)胞、QGY細(xì)胞、HT29細(xì)胞
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
SPC-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM.C1細(xì)胞、BC-024細(xì)胞、751細(xì)胞
alpha TC1 clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemic 1210細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞、H19-7細(xì)胞
MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
LLC-PK1 Adherent豬腎細(xì)胞系
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
MonoMac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
Hs 706.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC4細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞
H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞
TYK-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞
MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞
MCA 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
AN3-CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞
P3HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-OV-3細(xì)胞、REC 1細(xì)胞、KMS11細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
SPC-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM.C1細(xì)胞、BC-024細(xì)胞、751細(xì)胞
MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
LLC-PK1 Adherent豬腎細(xì)胞系
HBL 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
TFH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
C17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-453細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞
MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
Hs852細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細(xì)胞、V-79細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
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