"Hs 578Bst Adherent人正常乳腺細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：乳腺細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Hs 578Bst Adherent人正常乳腺細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞
Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB-1 Lu細(xì)胞、NB4細(xì)胞、TE 671細(xì)胞
293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞
HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
Hs 578Bst Adherent人正常乳腺細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞
Ramos.G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞、HUC細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞
293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞
NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
Hs 578Bst Adherent人正常乳腺細(xì)胞系
PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
HEK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0366細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞、Namalva細(xì)胞
Hep G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU1細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞
H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv-1細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
DU-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞
A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞
RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞
MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞
Leukemia 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞
MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞、L-428細(xì)胞
SKNF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞
Pa17C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞
Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
SUDHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-119細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、COS1細(xì)胞
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
NCI-H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888 Lu細(xì)胞、KU.812細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞
Hs 578Bst Adherent人正常乳腺細(xì)胞系
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞
SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞
E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細(xì)胞、769P細(xì)胞、RMG1細(xì)胞
BrCL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM2-4175細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX1細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞
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