"hTERT-RPE1 Adherent人視網膜色素上皮細胞系
細胞背景資料：視網膜色素上皮；hTERT永生；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
hTERT-RPE1 Adherent人視網膜色素上皮細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
H647ell細胞系相關產品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
Pa017C細胞系相關產品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
Pt-K1細胞系相關產品：HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
NCIH1836細胞系相關產品：WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
PAEC細胞系相關產品：HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞
TO 175.T細胞系相關產品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
細胞生長特性：貼壁
hTERT-RPE1 Adherent人視網膜色素上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
MDA-MB-175-VII細胞系相關產品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
G361細胞系相關產品：EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
TO175T細胞系相關產品：CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
LS 123細胞系相關產品：LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
C 6細胞系相關產品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
LU165細胞系相關產品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
A 549細胞系相關產品：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
TE 85.T細胞系相關產品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
NB-4細胞系相關產品：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞
RAMOS2G64C10細胞系相關產品：McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關產品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關產品：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
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LICR-LON-HN6-R細胞系相關產品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
SKMES細胞系相關產品：THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
PLMVEC細胞系相關產品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
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PSN1細胞系相關產品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
MSC細胞系相關產品：CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
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YES 2細胞系相關產品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
Hs 888.Lu細胞系相關產品：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關產品：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
N1E-115細胞系相關產品：87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
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7860細胞系相關產品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
Hs-274-T細胞系相關產品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
COLO 320 DM細胞系相關產品：HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
UO31細胞系相關產品：MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
WEHI 3B細胞系相關產品：Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
FU-97細胞系相關產品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
BHP10-3細胞系相關產品：A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
MGH-U1細胞系相關產品：OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
NCIH647細胞系相關產品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
KMB 17細胞系相關產品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
RIN-14B細胞系相關產品：Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
SKNBE細胞系相關產品：PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
KYSE 180細胞系相關產品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
RPE D407細胞系相關產品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
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Emory University-2細胞系相關產品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞
A549ATCC細胞系相關產品：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞
FHL-124細胞系相關產品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
Hs 888.Lu細胞系相關產品：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
Hs695細胞系相關產品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
MEC1細胞系相關產品：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞
GDM-1細胞系相關產品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
HT 1376.T細胞系相關產品：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
LA-N-6細胞系相關產品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
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TO175T細胞系相關產品：CMT167細胞、CLONE M3細胞、HEK-293-FT細胞
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