"HCEC-B4G12 Adherent人角膜內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：角膜；內(nèi)皮細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCEC-B4G12 Adherent人角膜內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進(jìn)展，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜，需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多，下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對(duì)細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對(duì)于不需要長期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞
NCI-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞、102PT細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
PTK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC154細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
HCEC-B4G12 Adherent人角膜內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞
NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
R2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、SW-620細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2008細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
HCEC-B4G12 Adherent人角膜內(nèi)皮細(xì)胞系
Panc 5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WBF344細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞
MHCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細(xì)胞、H2110細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞
HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞
NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
NCI N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC-803細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
HT144-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 436細(xì)胞、C6細(xì)胞、IHH細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞
SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞
WPMY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TJ905細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
H9c2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU_145細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞
DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細(xì)胞、NRCC細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞
V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
HEK-293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細(xì)胞、Reh細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞
FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
HCEC-B4G12 Adherent人角膜內(nèi)皮細(xì)胞系
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
EC9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞
OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細(xì)胞、RK-13細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞
TERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-55細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞
MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hs 68細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、TM4細(xì)胞
ESC-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-143B細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞
P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞
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