"NRK Adherent大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:腎;自發(fā)永生;Osborne-Mendel
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NRK Adherent大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫(xiě)傳代記錄。
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞
SF 295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 453細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞
NKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-SVEC01細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COLO 699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
NRK Adherent大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞
HuH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞
OC 316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-539 BT細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞
RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞
KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
AtT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞
NRK Adherent大鼠腎細(xì)胞系
Panc-813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞、OE-19細(xì)胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1755細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
B-95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
Caov-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR983F細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞、SW13細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
TYK-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞
SKMEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-134細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞、MV4II細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞
HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞
10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞
hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞
87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888 Lu細(xì)胞、KU.812細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
UM-UC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞
Hs706T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR786細(xì)胞、JC細(xì)胞、Panc02細(xì)胞
NRK Adherent大鼠腎細(xì)胞系
Fetal Human Lens-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞
A72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、PF382細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
Hs-852-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞
C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、H358細(xì)胞
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