"C8-D1A Adherent鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該永生化細(xì)胞系源自出生8天小鼠小腦組織,由B Pessac, D Trisler建立。該細(xì)胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特征。該細(xì)胞為GFAP陽性細(xì)胞,除此之外,沒有檢測(cè)到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的分子標(biāo)記。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
C8-D1A Adherent鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
C8-D1A Adherent鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞
NCI-H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞
LPC-H12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 42細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞
COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
NCI-H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H441細(xì)胞、GM03671細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞
C8-D1A Adherent鼠小腦細(xì)胞系
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
BxPC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細(xì)胞、M 1細(xì)胞、H-345細(xì)胞
C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞
HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
OCI-AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細(xì)胞、MC9細(xì)胞、SW 837細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞
RPE-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1.6細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
NCI H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞
Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞
CATHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
Huh 7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM(TK-)細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、UM2細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞
SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞
SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
KYSE410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
C8-D1A Adherent鼠小腦細(xì)胞系
SUM52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-12細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞
RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞
OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞
SUDHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-1細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞、LS123細(xì)胞
GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞
COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、H-2405細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
"