"ID8 Adherent小鼠卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS細(xì)胞、AD293細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞
GM05372E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU423細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
MDAMB330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞
JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
BT483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN-12C細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
WM 266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細(xì)胞系
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞
NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞
SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞
NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞
HUVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細(xì)胞、H2081細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞
IAR-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞
NCI-H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞
KOPN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
DSL-6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-420細(xì)胞、MDA175細(xì)胞、A427細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞
QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞
RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞
AgC11x3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman M3細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
NIH:OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori:3細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞
OPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-YN細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞
V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞
SW1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
CAL-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-Bladder-V細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞
ID8 Adherent小鼠卵巢癌細(xì)胞系
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞
MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞、FK81細(xì)胞
K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞
H-345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞
Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞
L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞
SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH 82細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、NF639細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
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