"ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
PY8119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細(xì)胞、LN382細(xì)胞、BC-022細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
CCD 966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細(xì)胞、DHL8細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
KM12 SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、SCH細(xì)胞、GAK細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
JB-6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細(xì)胞、A2058細(xì)胞、AdHek細(xì)胞
NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細(xì)胞、TALL1細(xì)胞、H-226細(xì)胞
MDA MB 175 VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞
SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
HBZY 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞、REC1細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
A72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、PF382細(xì)胞
High 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞
AR42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L88細(xì)胞、TI-73細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞
MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞
Hs343T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 26細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞
OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞
DMS-153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞
TE-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細(xì)胞、MFC細(xì)胞、REC-1細(xì)胞
NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞
Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞
MDA MB 175 VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞
IPLB-Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
ECC10 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 6細(xì)胞、no.11細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞
HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
Panc 5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
GC-2spd(ts)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、JM1細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、SKMES細(xì)胞
KM.12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
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