"TE-11 Adherent人食管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TE-11 Adherent人食管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
REC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
細胞生長特性:貼壁生長
TE-11 Adherent人食管癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞
BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
T24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
NCI-H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
SK-N-BE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
TE-11 Adherent人食管癌細胞系
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
SJRH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
HCC202細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
HPBALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
CORL26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
NU-GC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞
PCI-4M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
SHSY-5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
TE-11 Adherent人食管癌細胞系
EC109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH細胞、Dakiki細胞、SK-NSH細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、HOS/MNNG細胞、CaSki細胞
PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、CAL33細胞
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