"NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用，近年來細胞學蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進展，細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜，需要的實驗設備種類繁多，下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉放-２０℃ １ hour，再轉入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材：細胞實驗中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
HCC1419細胞系相關產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
hTERTHME1細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
NCI-SNU-387細胞系相關產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
SUPM2細胞系相關產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
MRCV細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
IBMF-7細胞系相關產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
NCI-H1819細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
H-727細胞系相關產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
AN3CA細胞系相關產(chǎn)品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
JVM2細胞系相關產(chǎn)品：YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
SUDHL-4細胞系相關產(chǎn)品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
PL 45細胞系相關產(chǎn)品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
H1650細胞系相關產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
HEEpiC細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
SKMEL3細胞系相關產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
R 2 C細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
G292細胞系相關產(chǎn)品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
CHL1細胞系相關產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
RMC-1細胞系相關產(chǎn)品：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
KFB細胞系相關產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
KFB細胞系相關產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
OCI-LY-8細胞系相關產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
HEK293-A細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
S37細胞系相關產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
M-1 myeloid leukemia細胞系相關產(chǎn)品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
NCI-H157細胞系相關產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
OUMS-27細胞系相關產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
TEV-1細胞系相關產(chǎn)品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
IMR32細胞系相關產(chǎn)品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
NCI-HUT-460細胞系相關產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
HeLa 229細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
A 253細胞系相關產(chǎn)品：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
SNU-869細胞系相關產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
BrCL18細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
SNU-475細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
C-26細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
TE10細胞系相關產(chǎn)品：V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞
Vero E6細胞系相關產(chǎn)品：HL-60細胞、OCIAML3細胞、HOS TE 85細胞
C-33-A細胞系相關產(chǎn)品：PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
Huh-7細胞系相關產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
U251細胞系相關產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
NTERA2D1細胞系相關產(chǎn)品：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
GES1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
ASH3細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
U373 MG細胞系相關產(chǎn)品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
COLO 320F細胞系相關產(chǎn)品：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關產(chǎn)品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
H1688細胞系相關產(chǎn)品：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
GM00346B細胞系相關產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
TGBC11T細胞系相關產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
NCI-H810細胞系相關產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
COLO-829細胞系相關產(chǎn)品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
NU-GC-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
A-375細胞系相關產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
NCM460 Adherent結直腸腺癌細胞系
LC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
293-H細胞系相關產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
E.G7-OVA細胞系相關產(chǎn)品：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
N-87細胞系相關產(chǎn)品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
P815細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
H-2172細胞系相關產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
BSC-1細胞系相關產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
KYSE-30細胞系相關產(chǎn)品：95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
B16-F10細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細胞、UPCISCC090細胞、Calu-1細胞
H727細胞系相關產(chǎn)品：OCM-1細胞、UCH-1細胞、SN4741細胞
H719細胞系相關產(chǎn)品：CAL-78細胞、OKT 3細胞、NIH:OVCAR-10細胞
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