"NCI-H1299 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：這株細胞來源于一個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。患者接受了初期放療。細胞均一性的部分缺失p５３蛋白，并缺少p５３蛋白表達。細胞可以合成０.１pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1299 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
細胞傳代方法：１：２傳代；３天傳代一次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H1299 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣；多角形
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
TE671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
KY-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
NCI-H1299 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
MHH-CALL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
NCI-H165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
JAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
NCI-H1299 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
NCI-H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
WM35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細胞、Hs895.T細胞、PC 12細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細胞、MRC9細胞、WC00044細胞
"