"AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細(xì)胞株,但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細(xì)胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。 跟HEK293細(xì)胞一樣,AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因,當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒,pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時(shí),可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項(xiàng):1.打開無菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈,消毒半小時(shí)以上。2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī),等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái),應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。
Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1395細(xì)胞、87 MG細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
T 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB415細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候,有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
OV1/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
Ketr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
ASH-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1703細(xì)胞、SW756細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞
SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞
NCI-H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞
Hs 746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:APRE-19細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞系
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞
NMC-G1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
MC-3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞
WPE-int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2108細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、BIC細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
HuTu 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-2664細(xì)胞、HcaF細(xì)胞、GM01232細(xì)胞
U-937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC 11細(xì)胞、JM細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
Kit225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞
NCIH3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy 926細(xì)胞、A-375細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞
RAW264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細(xì)胞、U-266細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞
NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
A673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN1細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
DHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 BL6細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞、PL-12細(xì)胞
IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞
HT144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4.2細(xì)胞、COLO829細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
SK-MES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G519細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞、MB468細(xì)胞
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞系
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞
RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞
HT-1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞
UACC-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞
CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1E115細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、SW-900細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細(xì)胞、H1882細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞
C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、SNU668細(xì)胞
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