"AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞背景資料：我們推薦使用AAV-２９３細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-２９３源自普遍使用的 HEK２９３細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK２９３細胞是剪切過的腺病毒５型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞。 跟HEK２９３細胞一樣，AAV-２９３細胞反式表達腺病毒E１基因，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E１缺失助質(zhì)粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞
T 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BC-027細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
GM17346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
細胞生長特性：貼壁生長
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
如何進行細胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復(fù)蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
HSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
ASH-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
RMS1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
Hs 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
CWR-22rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
NCIH2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
NCIH2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
WPE-int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
Tb1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞
U-937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞
OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
A673細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN1細胞、SHI-1細胞、UCW 100細胞
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
Hs 934.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
T/G HA VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
AAV-293 Adherent腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
INS-1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞
A253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
HSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、HCC2279細胞、SW-900細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、H1882細胞、WM 239-A細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細胞、Kuramochi細胞、SNU668細胞
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