"8305C Adherent人類甲狀腺未分化癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
8305C Adherent人類甲狀腺未分化癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
NS-I/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
細胞傳代方法:1:6傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COR-L23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
SPCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
8305C Adherent人類甲狀腺未分化癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
8305C Adherent人類甲狀腺未分化癌細胞系
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
JM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
JM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
P 3 HR 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞
SKNBE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞
FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
NHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
SUIT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
Normal Rat Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞
CT26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
MDAMB175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
L929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
RPE-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞
NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
MEG01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
BT-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞
EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
8305C Adherent人類甲狀腺未分化癌細胞系
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
GM04154B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
SL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、T98G細胞、Hs578Bst細胞
BJA-B-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES1細胞、MDBK細胞、CCLP-1細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細胞、WM 266-4細胞、NCIH2286細胞
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