"SK-MEL-24 Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SK-MEL-24 Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。３．剪開(kāi)紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時(shí)，處理方式為：在寄送過(guò)程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象，若有任何問(wèn)題，不要打開(kāi)蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后，于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤(pán)，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
TMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU3細(xì)胞、SF 295細(xì)胞、BOWES細(xì)胞
L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
SK-MEL-24 Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：星形的
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞
ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
HCV-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞
RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
SK-MEL-24 Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
4T1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞
LTEP-s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC6細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞、TR 146細(xì)胞
Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞
A9 (Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
HO-1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGLH7細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞
P116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
MGH-U1 (EJ)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞、H1436細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞
U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1648細(xì)胞、H-460細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
RPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞
B16 F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細(xì)胞、H-1703細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞
NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞
CHL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞
JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
OV-CA 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、OP-9細(xì)胞
IPEC-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞
Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞
SK-MEL-24 Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
P31 FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB453細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細(xì)胞、P388細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、N-9細(xì)胞
H4IIEC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
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