"COV362 Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
COV362 Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞
H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞
C3H-10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細(xì)胞、ATN1細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
C 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
COV362 Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會影響到細(xì)胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
HT 1376.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
HEC-1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL2細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞
ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞
RPVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
COV362 Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
HM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細(xì)胞、P388D1細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞
A-2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞、BALL1細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
RPMI-8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞
EBC-1/original細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞
BV2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
SK-MEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、SW 403細(xì)胞
H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
LOU-NH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
SK MEL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 420細(xì)胞、AKR細(xì)胞、Case 3細(xì)胞
BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
SW 1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細(xì)胞、H-345細(xì)胞、GT38細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
ELD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞
COV362 Adherent人卵巢癌細(xì)胞系
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細(xì)胞、A-673細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞
SUM 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞
R D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
P31/FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2A細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞
PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞
Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細(xì)胞、TE15細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
HT 1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL 6細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞
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