"A-549 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話，這個細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
A-549 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細(xì)胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
NRK clone 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322T細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞、OE21細(xì)胞
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A-549 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
AZ-521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞
L6565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637F細(xì)胞、MB157細(xì)胞、DU145細(xì)胞
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
H-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細(xì)胞、PC3M細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞
Tca-8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞、NP-69細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
A-549 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞
IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
GC9811-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip973細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞
RKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞
RKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞
NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞
STO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1092細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞、H-146細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2157細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞
rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
HEK293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞
Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
Hs 578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-AS細(xì)胞、F98細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
NCI-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細(xì)胞、Rat1細(xì)胞、LS180細(xì)胞
OCI-AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞
H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
MXI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞
LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC-Y細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞、CT-26細(xì)胞
HCT116/L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 1005細(xì)胞、LAC細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞
Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞
Super Tube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII/St細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞、TE5細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞
Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、SNGM細(xì)胞
F36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞、373MG細(xì)胞
NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞
A-549 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852T細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
"