"GLAG-66 epithelioid cells人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
SCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
GLAG-66 epithelioid cells人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞
MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
GLAG-66 epithelioid cells人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞
H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞
LS-174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
GLAG-66 epithelioid cells人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞
Kit-225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC8024細(xì)胞、ST486細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞
RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞
MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
BLO11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞
H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細(xì)胞、COLO679細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞
H-1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-13細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、U343MG細(xì)胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞
THP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-226細(xì)胞、C2C12細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞
RWPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞
HOS-143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL6A/C1細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞
AgC11x3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman M3細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
FU-OV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH526細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞
DMS 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
A2780-CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.T細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細(xì)胞、HT細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
NCI H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞
mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞
GLAG-66 epithelioid cells人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系
CBRH7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP100細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞、BT 325細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
FM-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM H-2細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
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