"HCC15 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話(huà),這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
MC3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
HCC15 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫(xiě)傳代記錄。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
OSC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HCC15 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶(hù)拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶(hù)收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀(guān)察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀(guān)察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
OCI-Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞
KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞
SK-RC 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞
Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞
BCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、High-5細(xì)胞、H-810細(xì)胞
RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞
HCC15 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
L615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132C細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
WM266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-39細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
C17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-453細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞
HCEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe1細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞
NW-MEL-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞
SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
F-36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細(xì)胞、NB9細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞
OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
NCI-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細(xì)胞、H226細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞
GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞
RMG-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞、293T/17細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
SW 527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-3細(xì)胞、H1435細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞
B-CPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細(xì)胞、SW 527細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
UPCISCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC133細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞、138 MG細(xì)胞
LS 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1080細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞、H-661細(xì)胞
NCI-H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-407細(xì)胞、Case 3細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞
C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞
SUDHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-1細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞、LS123細(xì)胞
SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞
H4-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
HCC15 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
Y3-Ag123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549-Taxol細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
OCI-Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
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