"SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
TE-8細胞系相關產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
HEK (AD293)細胞系相關產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
細胞傳代方法：３-４天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H1395細胞系相關產(chǎn)品：MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
MOLM13細胞系相關產(chǎn)品：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
SCC 9細胞系相關產(chǎn)品：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
細胞生長特性：懸浮生長，少量貼壁
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
Panc_04_03細胞系相關產(chǎn)品：YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
GC9811-P細胞系相關產(chǎn)品：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
RGB細胞系相關產(chǎn)品：RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
L5178Y細胞系相關產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
UM-UC-14細胞系相關產(chǎn)品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
HO-8910 PM細胞系相關產(chǎn)品：CL-40細胞、H-2227細胞、NCI-H345細胞
UCLA SO M21細胞系相關產(chǎn)品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
LNT-229細胞系相關產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
CMT-93細胞系相關產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
ECC 12細胞系相關產(chǎn)品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
SKOV3細胞系相關產(chǎn)品：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
CAOV4細胞系相關產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
MDA-MB-436細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
CORL23細胞系相關產(chǎn)品：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
RA 1細胞系相關產(chǎn)品：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
32D.cl3細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞
RCM1細胞系相關產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
BCaP 37細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
NCI H716細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
BHP-10細胞系相關產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
NCI-H647細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
H498細胞系相關產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
C17.2細胞系相關產(chǎn)品：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
H1573細胞系相關產(chǎn)品：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
MDA-MB-435細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
H-441細胞系相關產(chǎn)品：769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
H2170細胞系相關產(chǎn)品：MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
NCIH1792細胞系相關產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
Walker 256細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
NBL-4細胞系相關產(chǎn)品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
RCK-8細胞系相關產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
C2BBe1細胞系相關產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
HOPC細胞系相關產(chǎn)品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
U251-MG細胞系相關產(chǎn)品：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
NCI-H889細胞系相關產(chǎn)品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
NCI-HUT-520細胞系相關產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
FRhK-4細胞系相關產(chǎn)品：IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞
RFL 6細胞系相關產(chǎn)品：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
EFM-19細胞系相關產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
NCIH1650細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
RKN細胞系相關產(chǎn)品：Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞
NSH細胞系相關產(chǎn)品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
RBMEC細胞系相關產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
HEC151細胞系相關產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
CCD841CoN細胞系相關產(chǎn)品：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞
BEND細胞系相關產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
ST 486細胞系相關產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
ST 486細胞系相關產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
639-V細胞系相關產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
OKT 3細胞系相關產(chǎn)品：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
OCIAML5細胞系相關產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
SNU449細胞系相關產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
SHP-77 Adherent人肺癌細胞系
MV 4;11細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
HCC1171細胞系相關產(chǎn)品：Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
UACC893細胞系相關產(chǎn)品：H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關產(chǎn)品：HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
GM03569D細胞系相關產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
EBC-1/original細胞系相關產(chǎn)品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
CCRF/CEM細胞系相關產(chǎn)品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
RCC-10RGB細胞系相關產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
PK15細胞系相關產(chǎn)品：WM 2664細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、CAL33細胞
HRCEC細胞系相關產(chǎn)品：Calu3細胞、CTLL(2)細胞、MHCC97H細胞
RGB細胞系相關產(chǎn)品：RL細胞、SK HEP 01細胞、NU-GC-4細胞
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