"NGP epithelioid cells人神經(jīng)母細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
SU-DHL-1細胞系相關產品:DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
BDCM細胞系相關產品:OCI/AML2細胞、Plaepi 34細胞、SUIT-2細胞
ECC-10細胞系相關產品:LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
細胞生長:貼壁
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質合成速度降低,已有蛋白質結構變化,特異蛋白質成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
RKO細胞系相關產品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關產品:Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞
HuH-6細胞系相關產品:CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
HCM細胞系相關產品:HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
OCI AML2細胞系相關產品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
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細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
MB39細胞系相關產品:Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
C32r細胞系相關產品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
NCM-460細胞系相關產品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關產品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
HN13細胞系相關產品:16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞
MOLT-16細胞系相關產品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
BRL-3A細胞系相關產品:Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
CHO/dhFr-細胞系相關產品:MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
SKRC-39細胞系相關產品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
PA1細胞系相關產品:Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
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BEL-7405細胞系相關產品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
BCP1細胞系相關產品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
AML12細胞系相關產品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
PC-14細胞系相關產品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
L615細胞系相關產品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
C8161細胞系相關產品:H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
C8161細胞系相關產品:H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
H-322細胞系相關產品:LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞
CCRF細胞系相關產品:EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
MDAMB157細胞系相關產品:MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
MIN6細胞系相關產品:NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
PT67細胞系相關產品:CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
BHP-10細胞系相關產品:SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
LIXC-002細胞系相關產品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
COS-7細胞系相關產品:U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞
F9細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
DU 4475細胞系相關產品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
OVCAR10細胞系相關產品:U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
COLO-679細胞系相關產品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
143B TK-細胞系相關產品:GM03571細胞、MH-22a細胞、SK RC 52細胞
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JIMT-1細胞系相關產品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
FO [Mouse myeloma]細胞系相關產品:P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞
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Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
WIL2 Secreting細胞系相關產品:H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關產品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
SKBR-3細胞系相關產品:RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞
NCIH209細胞系相關產品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
PaCa2細胞系相關產品:NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關產品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
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U266細胞系相關產品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
GM07404A細胞系相關產品:SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
SUPB-15細胞系相關產品:CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
H1373細胞系相關產品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
GMK,BSC-1細胞系相關產品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
159 PT細胞系相關產品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
SW 1990細胞系相關產品:MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
SCC VII細胞系相關產品:AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
SkMel31細胞系相關產品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
VERO C 1008細胞系相關產品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
SV40 MES 13細胞系相關產品:DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
Hs-606-T細胞系相關產品:SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞
CAL78細胞系相關產品:MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
SK-MES1細胞系相關產品:G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
526細胞系相關產品:SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞
HT55細胞系相關產品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
P31 FUJ細胞系相關產品:MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
SKNSH細胞系相關產品:OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
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CAL 148細胞系相關產品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
Panc 8.13細胞系相關產品:BC-3H-1細胞、Henrietta Lacks cells細胞、WERI Rb-1細胞
H209細胞系相關產品:HN6細胞、Cates-1B細胞、NPC-TW039細胞
NCM-460細胞系相關產品:H-2227細胞、CHP126細胞、EJ細胞
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關鍵字: NGP epithelioid cells人神經(jīng)母細胞系
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