"FU-OV-1 epithelioid cells人卵巢癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
M-O7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
細胞生長:貼壁
FU-OV-1 epithelioid cells人卵巢癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
HIEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
FU-OV-1 epithelioid cells人卵巢癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
TNC-1B12B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
Pt-K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
FU-OV-1 epithelioid cells人卵巢癌細胞系
Melanoma 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細胞、NSC-34細胞、OVCAR5細胞
WEHI-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞
NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
LIXC002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細胞、H660細胞、C17細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
TSCCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
NCI-H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
MyLa2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
SKNBE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
OVCA-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞
HCT116/L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
F81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
SUPB-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
CT-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
FU-OV-1 epithelioid cells人卵巢癌細胞系
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細胞、SCaBER細胞、HONE-1細胞
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLL-CII細胞、RIN Cl-5F細胞、HuPT3細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、OVCAR 5細胞、GC-2細胞
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