"APRE-19 epithelioid cells人視網(wǎng)膜上皮細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
SW-954細胞系相關產品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
SkChA-1細胞系相關產品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
EFO 27細胞系相關產品:TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
細胞生長:貼壁
APRE-19 epithelioid cells人視網(wǎng)膜上皮細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
SKLU-1細胞系相關產品:SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
Hs819.T細胞系相關產品:SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
NCI-H727細胞系相關產品:T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
Kupffer細胞系相關產品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關產品:GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
APRE-19 epithelioid cells人視網(wǎng)膜上皮細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
751細胞系相關產品:SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
COLO-829細胞系相關產品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
BEL/FU細胞系相關產品:KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
HPB-ALL細胞系相關產品:Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
HMO6細胞系相關產品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
MAVER細胞系相關產品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
L5178YR細胞系相關產品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
Case 3細胞系相關產品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
293E細胞系相關產品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
Simpson細胞系相關產品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
APRE-19 epithelioid cells人視網(wǎng)膜上皮細胞系
HEK293-H細胞系相關產品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
H283細胞系相關產品:U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞
Glioma 261細胞系相關產品:A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞
FRH-0201細胞系相關產品:LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
GM02219細胞系相關產品:KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
CWR22R細胞系相關產品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
U-251細胞系相關產品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
2BS細胞系相關產品:alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
ECC 10細胞系相關產品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
SHZ-88細胞系相關產品:PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
H-23細胞系相關產品:L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
CTX TNA2細胞系相關產品:JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關產品:SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
Hs746T細胞系相關產品:CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
T98細胞系相關產品:SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
HEK 293 c18細胞系相關產品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
NCI H345細胞系相關產品:TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
NPA87細胞系相關產品:DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
OEC33細胞系相關產品:ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
SK-MEL-1細胞系相關產品:BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞
HGC27細胞系相關產品:SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
N1E115細胞系相關產品:ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
AR42J細胞系相關產品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
H3255_DA細胞系相關產品:HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
Hk-2細胞系相關產品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
BetaTC6細胞系相關產品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
WIL2 S細胞系相關產品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
HEC1-B細胞系相關產品:HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
Pt K1細胞系相關產品:Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
AX-Mel細胞系相關產品:TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
LC-2 ad細胞系相關產品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
NCIH524細胞系相關產品:SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞
PMVEC細胞系相關產品:BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關產品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
1E8-H細胞系相關產品:RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
SK-MES細胞系相關產品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
373MG細胞系相關產品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
EU-2細胞系相關產品:TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
NW38細胞系相關產品:H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
Hs 611.T細胞系相關產品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞
SK-GT-2細胞系相關產品:D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
Madison lung細胞系相關產品:WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
MyLa 2059細胞系相關產品:B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
SK RC 20細胞系相關產品:OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞
LS-180細胞系相關產品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
CHO細胞系相關產品:MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
Cates 1B細胞系相關產品:KP2細胞、67NR細胞、A549細胞
DOK細胞系相關產品:GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
Hs819T細胞系相關產品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關產品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
APRE-19 epithelioid cells人視網(wǎng)膜上皮細胞系
Hs 706.T細胞系相關產品:NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
TE354T細胞系相關產品:A2008細胞、NCTC-929細胞、ZR75_1細胞
Panc-327細胞系相關產品:HCEC-12細胞、MDA-468細胞、Y 1細胞
BEL/FU細胞系相關產品:KOSC-2 cl3-43細胞、HGF-1細胞、H-295R細胞
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關鍵字: APRE-19 epithelioid cells人視網(wǎng)膜上皮細胞系
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