"HPDE6c7 epithelioid cells人正常胰腺導(dǎo)管上皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
細胞生長：貼壁
HPDE6c7 epithelioid cells人正常胰腺導(dǎo)管上皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
MEG01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
NeHepLxHT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HPDE6c7 epithelioid cells人正常胰腺導(dǎo)管上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
PANC-08-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
SNG-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
293/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞
CAL27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
HPDE6c7 epithelioid cells人正常胰腺導(dǎo)管上皮細胞系
Swiss 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
CAOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
NCI-H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
CP-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
LOUNH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
IPEC-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
253J B-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
H-2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞
JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
YAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
HUCCT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
2B4-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
NCI-SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
MAD109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
C1R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
HPDE6c7 epithelioid cells人正常胰腺導(dǎo)管上皮細胞系
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
MALME.3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NIHOVCAR3細胞
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、EA.hy 926細胞、RCC10細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNEpC細胞、WM-2664細胞、Jeko1細胞
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