"BC-025 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
P3X63NS1細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
C-33 A細胞系相關產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
Hs-27細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
細胞生長：貼壁
BC-025 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HANK-1細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
TCam 2細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
PC-12細胞系相關產(chǎn)品：SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
AGS細胞系相關產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BC-025 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
B4G12細胞系相關產(chǎn)品：MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
ST2細胞系相關產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
Hs-281-T細胞系相關產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
COLO-357細胞系相關產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關產(chǎn)品：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
H-1993細胞系相關產(chǎn)品：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞
Hs 832(C).T細胞系相關產(chǎn)品：H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
HFL-I細胞系相關產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
SPDC-CCL141細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
hMSC-BM細胞系相關產(chǎn)品：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
BC-025 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
D-341Med細胞系相關產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
293EBNA細胞系相關產(chǎn)品：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
EVSA/T細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
SRA01/04細胞系相關產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
Glioma-261細胞系相關產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
Glioma-261細胞系相關產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
HCC 2185細胞系相關產(chǎn)品：H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
LU65細胞系相關產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
HPAFII細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
T-24細胞系相關產(chǎn)品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
PC-9/GR細胞系相關產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
HRCEC細胞系相關產(chǎn)品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
HEK-AD293細胞系相關產(chǎn)品：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞
2PK-3細胞系相關產(chǎn)品：OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
RH-30細胞系相關產(chǎn)品：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關產(chǎn)品：F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
LN 382細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
NCI-H322細胞系相關產(chǎn)品：CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞
CCD19-Lu細胞系相關產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
U14細胞系相關產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
MPC11細胞系相關產(chǎn)品：GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關產(chǎn)品：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
MA-782細胞系相關產(chǎn)品：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
SNU-C1細胞系相關產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
PLC8024細胞系相關產(chǎn)品：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞
2PK3細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
WiDr-TC細胞系相關產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
HCASMC細胞系相關產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
BT549細胞系相關產(chǎn)品：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
P-36細胞系相關產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產(chǎn)品：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
SCC 25細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
EFO 27細胞系相關產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
WM 239-A細胞系相關產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
NCI-522細胞系相關產(chǎn)品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
CCD 966SK細胞系相關產(chǎn)品：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
Malme-3 M細胞系相關產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
Jijoye細胞系相關產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
SW 982細胞系相關產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
DLD-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
H82sclc細胞系相關產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
CCRF/CEM細胞系相關產(chǎn)品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
F-81細胞系相關產(chǎn)品：BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
DF1細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
MSF細胞系相關產(chǎn)品：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
PC3M-2B4細胞系相關產(chǎn)品：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞
BC-025 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
PK (15)細胞系相關產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
DU-145細胞系相關產(chǎn)品：HRGEC細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、NTERA-2/D1細胞
NOR-10細胞系相關產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、SNU398細胞
Hs281T細胞系相關產(chǎn)品：HBdSMC細胞、N1S1細胞、CALU1細胞
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