"K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤； C３H/HeN
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞
TMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU3細(xì)胞、SF 295細(xì)胞、BOWES細(xì)胞
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
SCLC21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
Hep II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1581細(xì)胞、Anglne細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞
HET-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3190細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞、LX-2細(xì)胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1755細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞
H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、BC-025細(xì)胞
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
HCC-9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞
HRC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細(xì)胞、HA1800細(xì)胞、MO59J細(xì)胞
J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞
GM3190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4-11細(xì)胞、C17.2細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞
SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞
MCF 10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞
LNCaP-C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6細(xì)胞、QGY細(xì)胞、HT29細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細(xì)胞、KE39細(xì)胞、SW-756細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞
RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞
D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
CHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞
HEC-1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
C57/B6-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs611T細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
SMMC7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
NCI-H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞
Hs 675.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PanC1細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞、NHEK細(xì)胞
SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞
LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞
K1735 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
A549ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1435細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H1184細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細(xì)胞、Namalva細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
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