"JHH-2 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肝癌；腹水轉(zhuǎn)移；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
RMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞
RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
JHH-2 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
JHH-2 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
WM-266-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
JHH-2 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系
F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞
MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞
MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
QGY-7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
Dami細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
AM-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK52E細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞、HN-6細(xì)胞
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
ES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-2細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞
Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞
JHH-2 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、C666-1細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
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