"NCI-H1693 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1693 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
UPCI:SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代,每周換液２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
HS578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H1693 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
CORL26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
BN-CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
Hs819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
IMR-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
GM3570細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-729細胞、OCILY10細胞、GM02132細胞
DHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
H-2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞
NCI-H1693 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
U-266 AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
SKMEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
SKMEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
HPDEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
LS-123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞
PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
NS-20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
SACC-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞
Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞
Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞
ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
Cates 1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP2細胞、67NR細胞、A549細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
LC2/Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
COLO 680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞
MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞
MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
SJSA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
NCI-H1693 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
H-820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細胞、PC-14細胞、PC14細胞
KYSE-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細胞、BV-173細胞、HFL 1細胞
BN-CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細胞、B16 BL6細胞、SNU-886細胞
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