"NCI-H1435 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1435 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
Nakata-1細胞系相關產(chǎn)品：H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
PG-4 S+L-細胞系相關產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
HDLM-2細胞系相關產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，每周換液２-３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
McARH7777細胞系相關產(chǎn)品：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
CMECs細胞系相關產(chǎn)品：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
WI 38細胞系相關產(chǎn)品：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
細胞生長特性：貼壁生長，松散
NCI-H1435 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
JM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
8305-C細胞系相關產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
PK-13細胞系相關產(chǎn)品：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
B16 F1細胞系相關產(chǎn)品：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
FHC細胞系相關產(chǎn)品：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
KP-2細胞系相關產(chǎn)品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
JVM3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
MDAMB175細胞系相關產(chǎn)品：FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
COLO 741細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
Tn5 B1-4細胞系相關產(chǎn)品：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產(chǎn)品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
NCI-H1435 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
MDA-MB-134細胞系相關產(chǎn)品：OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞
C33細胞系相關產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
FBHE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
FBHE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
Karpas 422細胞系相關產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
H-1666細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
SL1細胞系相關產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
MCF7細胞系相關產(chǎn)品：CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
BGC823細胞系相關產(chǎn)品：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
hTERT-RPE細胞系相關產(chǎn)品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
UT-7細胞系相關產(chǎn)品：HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
JIMT細胞系相關產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
H820細胞系相關產(chǎn)品：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
A 172細胞系相關產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
HUT-125細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞
TFK1細胞系相關產(chǎn)品：ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞
U138-MG細胞系相關產(chǎn)品：HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
Hs600T細胞系相關產(chǎn)品：SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
Keio University-19-19細胞系相關產(chǎn)品：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產(chǎn)品：U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
LTEP-a-2細胞系相關產(chǎn)品：BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞
OVCA-433細胞系相關產(chǎn)品：HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
A549-Taxol細胞系相關產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
SUM-190細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞
H-1563細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
CLL-CII細胞系相關產(chǎn)品：SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
ATDC5細胞系相關產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
MFC細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞
TKB-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
T241細胞系相關產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
Eca-109細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
MRC9細胞系相關產(chǎn)品：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
3T3NIH細胞系相關產(chǎn)品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
NCI H226細胞系相關產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
Karpas 422細胞系相關產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
Karpas 422細胞系相關產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
Dami細胞系相關產(chǎn)品：H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
NCI-H1666細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
NCI-522細胞系相關產(chǎn)品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
PTK-1細胞系相關產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
NCI-H1435 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
Kit-225-K6細胞系相關產(chǎn)品：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
HPAFII細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
CA922細胞系相關產(chǎn)品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
BCP-1細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
138 MG細胞系相關產(chǎn)品：HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
NCIH208細胞系相關產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
JM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
SuDHL 1細胞系相關產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
NCI-H1105細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
LNCaP.FGC細胞系相關產(chǎn)品：NB-19細胞、NCIH810細胞、OVCAR-433細胞
HFL-I細胞系相關產(chǎn)品：Tregs細胞、CFPAC1細胞、FT-293細胞
PK-13細胞系相關產(chǎn)品：PG-BE1細胞、CCRF-SB細胞、Psi-2 DAP細胞
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