"GP2d Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動作要輕,以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
GP2d Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題,很多時(shí)候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
UACC-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞
PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞
NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2—1:3傳代,每周換液2—3次
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
Co320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
GP2d Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書,包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細(xì)胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會長的慢,買個(gè)支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
Neuro-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞
OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞
GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞
SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細(xì)胞、YAC細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
3T6-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細(xì)胞、STC-1細(xì)胞、G361細(xì)胞
MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞
GP2d Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
NCI-H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞
NCI-H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
SNU-484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞
H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
NCI-H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H2170細(xì)胞
OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
McCoy B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞
SK-N-BE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細(xì)胞、NEC8細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
Cates-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞
hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞
SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞
NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞
SK Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324MED細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞
NCI-H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細(xì)胞、PT67細(xì)胞、H2108細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
DHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
HSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞
H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞
GP2d Adherent人結(jié)腸癌細(xì)胞系
HemECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞
NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞
NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞
Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞
VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細(xì)胞、SLK細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、M14細(xì)胞、DV90細(xì)胞
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