"SF126 Adherent人腦瘤細胞系
細胞背景資料：該細胞來源于星形膠質(zhì)細胞瘤；膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）陰性；可以特異地結(jié)合β-內(nèi)啡肽。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SF126 Adherent人腦瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我常看到一個比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
細胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
細胞生長特性：貼壁生長
SF126 Adherent人腦瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
RT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
H4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞
J82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
SF126 Adherent人腦瘤細胞系
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
H-2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞
PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
H-2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
CV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
SF126 Adherent人腦瘤細胞系
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
K562/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
3D4/21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL 124細胞、SK-HEP-1細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
MDA-MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細胞、S-16細胞、IHH-4細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細胞、Mouse Colon 38細胞、M3 Clone M-3細胞
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