"M059K Adherent人腦神經(jīng)膠質瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
M059K Adherent人腦神經(jīng)膠質瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的,現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的,現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
MV-3細胞系相關產(chǎn)品:H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
PG-LH7細胞系相關產(chǎn)品:RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
NCI-H520細胞系相關產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
細胞傳代方法:1:6-1:8傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BaF3細胞系相關產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
PC-3M 2B4細胞系相關產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
G361細胞系相關產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
細胞生長特性:貼壁生長
M059K Adherent人腦神經(jīng)膠質瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
MUS-M1細胞系相關產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
hSCC-25細胞系相關產(chǎn)品:SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
HT3細胞系相關產(chǎn)品:FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
EJ 138細胞系相關產(chǎn)品:IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞
Ishikawa細胞系相關產(chǎn)品:C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
NCI-H1770細胞系相關產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
N-9細胞系相關產(chǎn)品:PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
KASUMI6細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞
NCI-SNU-407細胞系相關產(chǎn)品:CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
Duke University 145細胞系相關產(chǎn)品:M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
CHP-100細胞系相關產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
MB468細胞系相關產(chǎn)品:Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
M059K Adherent人腦神經(jīng)膠質瘤細胞系
GM2132細胞系相關產(chǎn)品:CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞
RC13細胞系相關產(chǎn)品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞
AG06814-M細胞系相關產(chǎn)品:J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
AG06814-M細胞系相關產(chǎn)品:J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
HcerEpic細胞系相關產(chǎn)品:H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞
COR L279細胞系相關產(chǎn)品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
LN-18細胞系相關產(chǎn)品:SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞
CG-4細胞系相關產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
EFO-27細胞系相關產(chǎn)品:PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
JROECL21細胞系相關產(chǎn)品:OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
KM933細胞系相關產(chǎn)品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
SK-ChA-1細胞系相關產(chǎn)品:CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
Jurkat細胞系相關產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
SUDHL4細胞系相關產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
MOLT 16細胞系相關產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
COLO-394細胞系相關產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
INS1細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
CWR-22rv1細胞系相關產(chǎn)品:H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
RPMI-7951細胞系相關產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
MRC-9細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
YD-38細胞系相關產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
LY-R細胞系相關產(chǎn)品:EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
AMC-HN-8細胞系相關產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
IMR 32細胞系相關產(chǎn)品:RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
AD-293細胞系相關產(chǎn)品:C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Hs 888Lu細胞
Hs-578T細胞系相關產(chǎn)品:MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
HMrSV5細胞系相關產(chǎn)品:CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
MFHL-2細胞系相關產(chǎn)品:Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
CNE1-LUC細胞系相關產(chǎn)品:TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
SU86_86細胞系相關產(chǎn)品:HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
SNB.19細胞系相關產(chǎn)品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
251 MG細胞系相關產(chǎn)品:2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞
LMTK-細胞系相關產(chǎn)品:ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
H-719細胞系相關產(chǎn)品:Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
CHP 100細胞系相關產(chǎn)品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
NPA 87細胞系相關產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
SW 1088細胞系相關產(chǎn)品:NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞
Panc 10.05細胞系相關產(chǎn)品:U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
SuperTube細胞系相關產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
MDA415細胞系相關產(chǎn)品:H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
OCI-AML4細胞系相關產(chǎn)品:HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
BeWo細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
M059K Adherent人腦神經(jīng)膠質瘤細胞系
OVCAR 8細胞系相關產(chǎn)品:CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
DrG細胞系相關產(chǎn)品:H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關產(chǎn)品:MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
PE CA PJ34細胞系相關產(chǎn)品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
GLRK 13細胞系相關產(chǎn)品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
H526細胞系相關產(chǎn)品:PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
639-V細胞系相關產(chǎn)品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
GBCSD細胞系相關產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
NCI-H1048細胞系相關產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
BaF3細胞系相關產(chǎn)品:ECV304細胞、OE33細胞、PA-TU-8988S細胞
SPCA-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、HCFB(HCF)細胞、786-0細胞
HT29細胞系相關產(chǎn)品:SW 962細胞、SW962細胞、AX-Mel細胞
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