"Vero Adherent非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:Vero細(xì)胞株是日本千葉大學(xué)的YasumuraY和KawakitaY從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細(xì)胞常作為轉(zhuǎn)染宿主,用于支原體的檢測(cè)。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解:1)收到細(xì)胞,首先要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過(guò)離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長(zhǎng)期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長(zhǎng)較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞,次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Vero Adherent非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?!痉盅b稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng),傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個(gè)培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞、H69C細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
Vero Adherent非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細(xì)胞懸液接種】1)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液;3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí),腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);2)消毒動(dòng)物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號(hào)針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
MGC-803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞、MLFC細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
HEC1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞
LNCaP.FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
OVCA5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞
SKLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、H2085細(xì)胞、CNE2細(xì)胞
NCI-H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
Vero Adherent非洲綠猴腎細(xì)胞系
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞
SW1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞
LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞
NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
HP615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞、PIG1細(xì)胞
SUM-190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-F1細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細(xì)胞、PC9細(xì)胞、CEL細(xì)胞
NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞
NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞
Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞
C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
SGC-7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoTr細(xì)胞、DHL5細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
PANC-08-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
SK MES 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.3細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
G-401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細(xì)胞、OC316細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞
SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
PL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞
SK-OV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞
SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞
Vero Adherent非洲綠猴腎細(xì)胞系
SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞
BEL-7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細(xì)胞、P-36細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞
SCI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞、PIGI細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞
H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細(xì)胞、HD11細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
BCaP-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-FET細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、H810細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
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