"MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克?。矗ˋTCC CRL-2593)和MC3T3亞克?。保矗ˋTCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機(jī)鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們10天后形成一個礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。MC3T3亞克?。玻矗ˋTCC CRL-2594)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞
SW1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、L細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強(qiáng):實驗進(jìn)行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞
bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁
DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
aTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407 RPE細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞、4T1細(xì)胞
LLCMK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時,需避免反復(fù)吹打。
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
NCI-SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-441細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞
NTHY-ORI3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
GA-10 (Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM細(xì)胞、CEM細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞
NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
Mel RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFC細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞、H2135細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞
Hep G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU1細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
OCILY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、CV-1細(xì)胞
TE13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞
74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細(xì)胞、H-1581細(xì)胞、H6c7細(xì)胞
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
C22 (Clara)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞
B16-F10--RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3(A31)細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞
BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2OS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞
GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞
SW-579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML3細(xì)胞、M-G63細(xì)胞、MAVER細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
S91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞
M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞
MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞
HEL 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞
MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
Co320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞
U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞
ATDC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞
PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞
PLA 802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7ADR細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞
NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
F36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa-2細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞、373MG細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
HD-LM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC 20細(xì)胞、GM04679細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞
M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
LAPC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSAT細(xì)胞、SNU886細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cells|小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、870細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
NCI-SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-441細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
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